摘要
目的探讨不同浓度茶多酚(TP)对牙龈卟啉单胞菌脂多糖(Pg-LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(HUVECs中核因子-κB (NF-κB) p65表达影响。方法选取不同浓度的TP和Pg-LPS作用于HUVECs,用CCK-8细胞活性检测法对TP和Pg-LPS药物浓度进行筛选,选取Pg-LPS诱导TP预刺激后最适浓度的HUVECs建立炎症反应实验模型,将实验分为Control组、Pg-LPS组、LPS+TP1组(5 mg/L)和LPS+TP2组(40 mg/L),用Western blot法检测细胞核及胞浆内NF-κB p65蛋白表达。结果在不同浓度TP作用下(5 mg/L、10 mg/L、20 mg/L、40 mg/L),12 h HUVECs增殖率较24 h和48 h高,差异有统计学意义(P<0.05),其中作用浓度在5~40 mg/L时促进HUVECs增殖,达到80 mg/L后出现抑制作用;与Control组比较,在不同时间、浓度条件下(4 h、8 h、24 h;0.1μg/m L、1μg/mL、10μg/m L),Pg-LPS均会对细胞增殖产生抑制作用,且抑制率与作用时间和浓度相关(P<0.05),其中在相同作用时间下,浓度为10μg/m L的Pg-LPS的细胞抑制率最高,在相同浓度下,Pg-LPS作用24 h后细胞抑制率最高,在Pg-LPS的作用下,细胞核内的p65表达增加而胞浆内的p65表达降低;选取一定浓度的TP预处理HUVECs后,细胞核内NF-κB p65蛋白表达降低,浆内NF-κB p65蛋白表达增加。结论 TP对HUVECs的增殖与抑制作用与浓度及时间有密切的关系,具有低浓度促进、高浓度抑制与短时促进、长时抑制的作用;TP抑制Pg-LPS诱导的HUVECs中NF-κB p65由胞浆转位至细胞核,即抑制NF-κB p65活化,对HUVECs具有一定的保护作用。
- 单位