丹参对ox-LDL孵育的乳鼠心肌细胞缺氧-复氧所致细胞凋亡的保护作用

作者:张卓然; 王鲁川; 李鸿珠; 郭津; 王丽娜; 张伟华; 徐长庆
来源:中医药学报, 2009, 37(5): 19-22.
DOI:10.3969/j.issn.1002-2392.2009.05.007

摘要

目的:观察丹参对ox-LDL孵育的乳鼠心肌细胞缺氧-复氧损伤的保护作用,并探讨其可能机制.方法:采用原代培养乳鼠的心肌细胞,ox-LDL孵育24小时,再采用95%N2+5%CO2模拟缺氧培养3小时后,更换为正常DMEM培养液培养9小时的方法建立心肌细胞缺氧/复氧模型.乳鼠心肌细胞随机分为6组:正常对照组(Control group);ox-LDL组(ox-LDL group);ox-LDL缺氧-复氧组(ox-LDL +A/R group);丹参保护组,加丹参低剂量(SM L/ox-LDL +A/R group)、中剂量(SM M/ox-LDL +A/R group)、高剂量(SM H/ox-LDL +A/R group)组.利用MTT比色法检测心肌细胞存活率,Hoechst33342染色检测凋亡率,采用Western blot分别观察Cytc、Bax、bcl-2、caspase-3的蛋白表达.结果:通过MTT比色法检测,加入丹参高剂量组对细胞保护最有效.与Control组比较,ox-LDL组:细胞核有固缩和断裂,Cytc、Bax和caspase-3的表达升高,细胞存活率和bcl-2表达降低;与ox-LDL组比较,ox-LDL +A/R组:细胞核固缩和断裂加重,Cytc、Bax和caspase-3的表达进一步增加,细胞存活率和bcl-2表达则显著降低;SM /ox-LDL +A/R组:缺氧-复氧诱导的上述变化显著减轻.结论:丹参对ox-LDL孵育乳鼠心肌细胞的缺氧-复氧损伤具有保护作用,其机制与抑制氧化应激所致的细胞凋亡有关.

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