大黄素治疗类风湿关节炎的作用机制：基于网络药理学方法

作者：曹春浩; 曾丽; 荣晓凤^*

来源：南方医科大学学报, 2022, 42(06): 913-921.

DOI：10.12122/j.issn.1673-4254.2022.06.16

• 网路药理
• 大黄素
• 类风湿关节炎
• NF-κB通路

目的 基于网络药理学方法，运用在线数据库研究大黄素治疗类风湿关节炎的作用机制，并在成纤维样滑膜细胞细胞系中进行验证。方法 通过Targetnet、SwissTargetPrediction、Genecards、DisGeNET和OMIM数据库，分别获得大黄素作用靶点及类风湿关节炎相关基因，并构建靶点蛋白质相互作用网络（PPI），对交集基因进行Gene Ontology与KEGG通路富集分析。运用AutoDock4.2.6软件模拟分子对接。将大黄素与经TNF-α诱导的MH7A细胞共同培养，培养分组情况：空白对照组、模型组（TNF-α组，10 ng/mL）、药物干预组（TNF-α 10 ng/mL+Emodin20、40、60、80、100μmol/L）。采用CCK-8法、细胞划痕实验及流式细胞周期实验探究大黄素对MH7A细胞增殖的抑制作用。通过Western blot观察其NF-κB通路蛋白表达情况，通过Rt-PCR实验分析CAPS3、PTGS2(COX2)、MAPK14基因的表达。结果 获得大黄素和类风湿关节炎交集基因32个，其中心节点为CAPS3、ESR1、MAPK14等，主要涉及NF-κB信号通路等。分子对接提示大黄素与核心靶点能较好的结合。实验结果显示，大黄素能明显抑制MH7A细胞过度增殖（P<0.05）。Western blot结果显示，TNF-α诱导的MH7A细胞NF-κB蛋白表达水平升高（P<0.01），而予以大黄素80μmol/L干预后IκBα、p-NF-κB表达水平均有所降低（P<0.01）。Rt-PCR结果显示，TNF-a组COX2、P38MAPK(MAPK14)核心基因的表达量明显上调，而大黄素（80μmol/L）处理后各组COX2、P38MAPK14的mRNA表达下降mRNA的表达下降（P<0.01），凋亡相关基因CASP3上调。结论 大黄素通过调控细胞增殖凋亡，调节NF-κB等信号通路等发挥治疗类风湿关节炎作用。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院