DHV-I和DEV双重荧光定量PCR方法的建立

作者：陈肖韩; 刘海燕; 苏世博; 赵丽丽; 陈洪岩

来源：中国兽医科学, 2020, 1-7.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2021.0037

• Ⅰ型鸭肝炎病毒
• 鸭肠炎病毒
• 双重荧光定量 duck hepatitis virus type I
• duck plague
• double fluorescence quantification

为建立快速特异的能够鉴别诊断DHV-I和DEV的荧光定量PCR方法，根据NCBI中I型鸭肝炎病毒和鸭肠炎病毒的保守序列，采用BeaconDesigner7.5软件，设计了2对特异性引物和2条用不同荧光基团标记的TaqMan探针。接着，对反应条件进行优化，验证其特异性及敏感性。结果，该方法特异性好，对鹅细小病毒、番鸭细小病毒，禽流感病毒、新城疫病毒、鸭坦布苏病毒、禽网状内皮增生病毒、禽呼肠弧病毒、减蛋综合征病毒，鸭甲肝病毒3型9种病毒检测，均无荧光信号。而且其灵敏度高，对DHV-I和DEV的最小检出量均为200病毒基因组拷贝数。利用所建立的荧光定量PCR方法对江苏徐州采集的166份肛拭子进行检测...

• 单位
  中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 兽医生物技术国家重点实验室