摘要
目的探讨色素上皮衍生因子(PEDF)调控激素敏感性脂肪酶(HSL)抑制肥胖状态下脂肪动员的作用及机制。方法构建高脂喂养的肥胖小鼠模型,应用Western blot和荧光定量PCR检测PEDF和HSL的蛋白及mRNA水平;腹腔注射异丙肾上腺素(ISO)模拟激素诱导脂肪动员过程,应用Western blot检测HSL的磷酸化水平;培养3T3-L1并诱导分化为脂肪细胞,分别加ISO和AMPK激动剂利用Western blot研究PEDF调控HSL的分子机制。结果Western blot和荧光定量PCR检测结果提示高脂组PEDF蛋白水平和mRNA含量在各个时间点(4、8、12、16、20周)较普通组均明显上调,而HSL蛋白和mRNA水平在各个时间点较普通组均显著下调。在ISO诱导下,不同浓度(10、100、500 nmol/L)PEDF显著下调HSL磷酸化水平。Western blot检测提示PEDF可以同时下调脂肪细胞AMPK和HSL磷酸化水平。结论 PEDF可能通过抑制AMPK的磷酸化调控HSL,导致肥胖状态下体内甘油三酯进一步蓄积,最终诱导胰岛素抵抗等代谢异常疾病。
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单位生物化学教研室; 中山大学中山医学院