抗人CD86单链抗体的基因克隆、表达及结合活性分析

作者：安萌; 王志强; 朱华亭; 孔永; 王婧; 沈立军; 韩莲花; 夏永洁; 邱玉华

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2013, (02): 178-181.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.006672

• CD86
• 单链抗体
• 真核表达 CD86
• scFv
• eukaryotic expression

目的构建并在CHO细胞中表达抗人CD86单链抗体(CD86-scFv),研究该抗体与抗原的结合特性及介导的生物学功能。方法从分泌鼠源CD86抗体的杂交瘤细胞中克隆出VH和VL基因,构建含有前导肽L-VH-Linker-VL抗体编码基因的表达载体并转染CHO细胞。经筛选高分泌株并扩大培养后收集上清进行纯化。流式细胞术分析CD86-scFv对不同细胞膜型CD86分子的识别及与鼠源亲本抗体1D1的竞争抑制效应。MTT法分析CD86-scFv与Raji细胞表达的CD86结合后对细胞生长的影响。结果获得了稳定表达抗人CD86-scFv的CHO细胞株及相应抗体。CD86-scFv与CD86基因转染细胞株L...

• 单位
  苏州大学