摘要
目的:探讨重组人MG53蛋白(rhMG53)作为干细胞低温保护剂的特殊组分对小鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)冷冻保存后生物学特性的影响。方法:常规培养BMSCs,分为对照组(DMEM/F12培养基、FBS、DMSO的体积比为5∶4∶1并添加30 mg/L BSA)和rhMG53组(DMEM/F12培养基、FBS、DMSO的体积比为5∶4∶1并添加30mg/L rhMG53)冻存。冻存1 a后,复苏细胞,qRT-PCR检测两组细胞冻存复苏后干性相关基因Nanog、OCT4和SOX2 mRNA的表达; CCK-8法检测细胞增殖;台盼蓝染色检测细胞存活能力;茜素红S染色和油红O染色分别检测两组干细胞的成骨和成脂分化;免疫荧光检测两组细胞成神经分化相关因子DCX和NSE的表达。结果:与对照组相比,rhMG53组BMSCs的Nanog、OCT4和SOX2 mRNA表达无明显变化(P> 0. 05),但细胞增殖能力增强,存活率升高,成骨、成脂和成神经分化效率增加(P均<0. 05)。结论:rhMG53作为保护剂的特殊组分对冷冻保存的BMSCs有较好的保护效果。
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单位第一附属医院神经外科; 郑州大学; 生命科学学院