β-actin实时荧光PCR法的建立和在临床试验中的应用

作者：权娅茹; 陈震; 吉尚志; 邱平; 李长贵^*

来源：中国药事, 2022, 36(05): 535-540.

DOI：10.16153/j.1002-7777.2022.05.007

• 聚合酶链反应
• β-actin质粒
• 灵敏度
• 特异性
• 样本采集有效性
• 水痘减毒活疫苗
• 带状疱疹减毒活疫苗

目的：建立β-actin实时荧光聚合酶链反应(PCR)法，用于水痘减毒活疫苗和带状疱疹减毒活疫苗临床试验中样本采集有效性的判定，为临床试验中疫苗安全性判定和保护率的准确计算提供保障。方法：以β-actin质粒、水痘-带状疱疹病毒(VZV)为模板进行β-actin实时荧光PCR法体系的优化和灵敏度、特异性和重复性的验证及Cutoff值的确定。结果：建立的β-actin实时荧光PCR法特异性和重复性好，灵敏度为10 cps·μL-1。临床样本β-actin扩增成功率99.9%(1746份样本中只有1份β-actin扩增阴性)。结论：建立的β-actin实时荧光PCR法可满足临床试验中样本采集有效性的判定。

• 单位
  北京万泰生物药业股份有限公司; 中国食品药品检定研究院