人类ZAKβ与YWHAZ蛋白相互作用的初步研究

作者：赵晶; 王玮; 马雅婷; 施慧莉; 霍克克

来源：医学分子生物学杂志, 2008, 5(01): 1-6.

DOI：10.3870/j.issn.1672-8009.2008.01.001

• ZAKβ
• YWHAZ
• 丝裂原活化蛋白激酶
• 磷酸化
• 细胞周期 ZAKβ
• MAPK
• phosphorylation
• cell cycle

目的研究ZAKβ与YWHAZ蛋白之间的相互作用。方法以ZAKβ为诱饵蛋白,利用酵母双杂交筛选人类肝脏cDNA文库,经GST Pull-down、免疫共沉淀和细胞共定位实验分别验证ZAKβ与猎物蛋白在体外和细胞内的相互作用,构建ZAKβ的截短体以确定相互作用的区域,用磷酸化抗体检测ZAKβ在相互作用中的磷酸化作用,并通过流式细胞仪检测这对蛋白相互作用对细胞周期的影响。结果利用酵母双杂交筛选到一个能与ZAKβ相互作用的蛋白YWHAZ,并在体外和细胞内都验证了这二者的相互作用,发现这两个蛋白都能共定位于293T细胞的胞质中,确定了ZAKβ的N端1~250氨基酸为与YWHAZ蛋白相互作用的区域。体外实...

• 单位
  遗传工程国家重点实验室; 生命科学学院; 复旦大学