刺槐素对鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞NLRC4炎症小体活化的影响

作者：王兆霞; 补娟; 张晓玲; 叶勒丹·马汉; 吴选霞; 周玲^*

来源：海南医学院学报, 2022, 28(17): 1294-1298.

DOI：10.13210/j.cnki.jhmu.20220530.001

• 刺槐素
• 鞭毛蛋白
• NLRC4
• 活化
• 巨噬细胞

目的：研究刺槐素（Acacetin）对鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞Nod样受体家族蛋白4(the nod-like receptor family card domaincontaining protein 4,NLRC4)活化的影响。方法：将小鼠骨髓巨噬细胞分为对照组、脂多糖（LPS）组、LPS+鞭毛蛋白组及LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组，对照组加入完全培养基，LPS组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h,LPS+鞭毛蛋白组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h后加入鞭毛蛋白（10μmol/L）刺激0.5 h;LPS+刺槐素+鞭毛蛋白组用LPS(50 ng/mL)预处理3 h后再加入Acacetin(10μmol/L)处理0.5 h，最后加入鞭毛蛋白（10μmol/L）刺激0.5 h；采用WB检测细胞裂解液Pro-caspase-1和Pro-IL-1β的表达，上清液中caspase-1和IL-1β的蛋白表达；ELISA法检测上清液中IL-1β、IL-18和TNF-α的含量，LDH检测试剂盒检测细胞上清液中LDH的活性。结果：与对照组相比，LPS+鞭毛蛋白组细胞上清液中caspase-1、IL-1β蛋白表达明显增高，差异具有统计学意义（P<0.05），细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与LPS+鞭毛蛋白组比较，LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组细胞上清液caspase-1、IL-1β蛋白表达明显降低，差异具有统计学意义（P<0.05），细胞裂解液中Pro-caspase-1、Pro-IL-1β蛋白表达比较，差异无统计学意义（P>0.05）。ELISA结果显示，与对照组相比，LPS+鞭毛蛋白组细胞上清液中IL-1β、IL-18、TNF-α水平及LDH活性明显升高，差异均具有统计学意义（P<0.05）；与LPS+鞭毛蛋白组比较，LPS+Acacetin+鞭毛蛋白组细胞上清液IL-1β释放水平明显降低，差异均具有统计学意义（P<0.05）,IL-18、TNF-α的水平及LDH的活性降低，但差异无统计学意义（P>0.05）。结论：刺槐素可有效抑制鞭毛蛋白诱导的小鼠骨髓巨噬细胞NLRC4炎症小体的活化，减少细胞损伤。

• 单位
  新疆医科大学; 新疆维吾尔自治区人民医院