PCR和HRM两种方法检测细菌耐药基因aac(6′)-Ib-cr的比较研究

作者：白丽霞; 杨虹

来源：国际检验医学杂志, 2017, 38(03): 319-323.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4130.2017.03.011

• 高分辨熔解技术
• 基因
• 聚合酶链反应
• 细菌

目的研究聚合酶链反应(PCR)和高分辨熔解技术(HRM)两种方法检测细菌耐药基因氨基糖苷乙酰转移酶的变异基因(aac(6′)-Ib-cr)检出率的差异性。方法采用PCR方法检测299株临床常见的革兰阴性杆菌的aac(6′)-Ib基因,并以内切酶BtsCI酶切消化aac(6′)-Ib的PCR阳性产物以确定aac(6′)-Ib-cr;同时采用HRM技术检测以上所有菌株的aac(6′)-Ib和aac(6′)-Ib-cr基因。结果 PCR和酶切法共检出aac(6′)-Ib基因29株,其中有21株变异为aac(6′)-Ib-cr,变异率为72.4%(21/29)。而且HRM技术检测的结果与其完全一致。结论 PCR和HRM两种方法检测细菌耐药基因aac(6′)-Ib-cr的能力相当,可以用更简便的HRM技术替代PCR和酶切法检测aac(6′)-Ib-cr基因,尤其适用于大量筛检。

• 单位
  北京大学深圳医院