HEK293T细胞表达的单核细胞趋化蛋白1促进巨噬细胞迁移

作者：王媛媛; 赵俊龙; 刘娟; 姜亚丽; 韩骅; 秦鸿雁; 刘晓渭

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2016, 32(02): 149-152.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.007645

• 巨噬细胞
• 单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)
• 真核表达载体
• 载体构建

目的构建巨细胞病毒(CMV)启动子驱动的单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)真核表达载体,转染人胚肾HEK293T细胞,验证其对巨噬细胞的趋化作用。方法小鼠基因组DNA作模板,用PCR法获得MCP-1启动子区基因片段,插入p FLAGCMV1载体。用双酶切法和测序鉴定正确后,将构建好的病毒载体转染HEK293T细胞,用Western blot法检测MCP-1的表达,用TranswellTM实验检测转染后细胞分泌的MCP-1对巨噬细胞的趋化作用。结果重组载体酶切鉴定在相应位置有目的片段,转染单核细胞趋化因子重组载体后的HEK293T细胞有MCP-1表达,转染后HEK293T细胞分泌的MCP-1明显增加巨噬细胞的迁移。结论HEK293T细胞表达的MCP-1明显增强巨噬细胞的迁移。

• 单位
  第四军医大学; 西京医院肾脏内科