SARS-CoV-2混合稀释样本核酸检测效能分析

作者：赵睿^*; 程丽萍; 胡梅京; 尚红光; 张浩

来源：医学动物防制, 2023, 39(08): 799-807.

• 新型冠状病毒
• 混合稀释
• 核酸检测
• ORF1ab基因
• N基因
• Ct值

目的 评价混合稀释样本在新型冠状病毒(severe acute respiratory syndrome Coronavirus 2,SARS-CoV-2)核酸检测的效能，为大规模人群的SARS-CoV-2核酸检测提供参考方案。方法 于2021年3月至2021年11月分别采用有固定Ct值靶值的国家卫健委SARS-CoV-2阳性质控和第三方试剂公司的SARS-CoV-2弱阳性质控样本，用阴性样本分别以1∶5、1∶10、1∶15、1∶20进行稀释。以实时荧光定量聚合酶链反应(real-time fluorescence quantitative PCR,RT-qPCR)检测原始及各稀释度样本SARS-CoV-2双靶标ORF1ab基因和N基因，通过统计学分析混合样本检测效能。结果 阳性与弱阳性质控样本ORF1ab基因和N基因检测Ct值随样本稀释倍数增大而不断增大，各组检测Ct值均值一致性差异有统计学意义，阳性与弱阳性质控样本ORF1ab和N基因P值分别为0.015、0.013、0.021、0.023,均P<0.05。阳性与弱阳性质控样本ORF1ab基因和N基因阳性检出率随样本稀释倍数增加而下降。阳性质控样本在1∶20稀释时出现阴性检测结果；弱阳性质控样本超出1∶10稀释时出现阴性检测结果，且随着稀释倍数的增大超出试剂检测限，出现Ct值检测不出现象。阳性与弱阳性质控样本两靶标基因检测Ct值与稀释倍数之间相关系数均在0.9以上，呈高度正相关。结论 进行大范围人群SARS-CoV-2核酸检测筛查时，混合稀释样本应尽可能选择低倍稀释，不应超过10倍稀释，低于试剂检测限可造成假阴性结果。