人反义VEGF基因对肾癌细胞VEGF表达的影响

作者：潘周辉; 陈昭典; 杨太森

来源：中国病理生理杂志, 2005, (12): 2392-2395.

• 内皮生长因子
• 肾肿瘤
• 基因表达

目的:构建反义VEGF基因真核表达载体,研究其对肾癌细胞VEGF表达的影响。方法:克隆人 VEGF基因,将反义VEGF基因定向克隆于质粒PCDNA3．1(-)真核表达载体,酶切鉴定;转染入肾癌细胞,G418筛选阳性克隆。RT-PCR方法检测VEGFMRNA的表达,免疫组化法检测VEGF基因的蛋白表达,MTT法测细胞生长,流式细胞术检测细胞周期。结果:成功构建反义VEGF基因真核表达载体;反义VEGF组VEGFMRNA的表达受到抑制, 明显低于空载体组和对照组VEGFMRNA的表达,空载体组VEGFMRNA的表达没有受到影响;反义VEGF组的VEGF 蛋白表达明显低于空载体组和对照组,空载体组和对照组VEGF蛋白的表达无显著差异;反义VEGF组细胞生长减慢,G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。结论:人反义VEGF基因可明显降低肾癌细胞VEGF基因在转录和翻译水平的表达,抑制肾癌细胞生长,为肾癌基因治疗提供一定的实验依据。

• 单位
  郑州大学; 浙江大学附属第一医院