枇杷果实中NAD-MDH基因克隆及植物表达载体构建

作者：寇燕; 杨俊; 高欢欢; 陈旭; 郭傲; 郑国华^*

来源：福建农业科技, 2020, (04): 1-8.

DOI：10.13651/j.cnki.fjnykj.2020.04.001

• 枇杷
• NAD-MDH基因
• 基因克隆
• 表达分析
• 载体构建

为探索枇杷果实中苹果酸的积累与降解机制,从枇杷果实转录组中得到NAD-MDH的开放阅读框的基因序列。以枇杷高酸品种解放钟和低酸品种白梨为材料,提取果实中总RNA,运用RT-PCR技术克隆出枇杷果实中苹果酸合成酶基因NAD-MDH,并进行荧光定量PCR分析。结果表明:枇杷果实中苹果酸合成酶基因NAD-MDH的开放阅读框(ORF)为996bp,共编码了332个氨基酸。经荧光定量PCR分析,解放钟和白梨在花期后95d时NAD-MDH基因表达量最高;花后80～105d,NAD-MDH基因在高酸与低酸品种间存在显著差异。采用无缝克隆技术成功构建了植物表达载体EjNAD-MDH-PBI121,并导入根瘤农杆菌EHA105中得到植物转化工程菌,为后期利用转基因技术改良枇杷果实品质及遗传改良打下基础。

• 单位
  福建农林大学