中国莱姆病螺旋体FP1外膜蛋白C克隆表达及免疫保护性初步研究

作者：刘慧鑫; 郝琴; 侯学霞; 张琳; 刘炜; 楼永良; 吕建新^*; 万康林^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2015, 35(08): 573-576.

DOI：10.3760/cma.j.issn.0254-5101.2015.08.003

• 莱姆病螺旋体
• 外膜蛋白C
• 克隆表达
• 体外中和试验

目的克隆并表达中国莱姆病螺旋体(Borrelia afzelli)基因型代表菌株FP1的外膜蛋白C(OspC), 并对其免疫保护性进行初步研究。方法聚合酶链反应(PCR)扩增莱姆病螺旋体FP1的ospC基因, 克隆至原核表达载体pET-30a上, 构建pET-30a-OspC重组质粒, 转入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3)中, 利用IPTG诱导表达。表达产物用Ni-IDA树脂层析纯化, SDS-PAGE电泳、Western blot分析。将rOspC免疫新西兰白兔, 间接免疫荧光方法(IFA)检测免疫前、后兔血清中特异性抗体IgG的滴度, 进行体外中和试验, 从而对OspC的免疫保护性有初步的了解。结果重组质粒pET-30a-OspC构建成功并在宿主菌内高效表达;Western blot表明rOspC与莱姆病螺旋体FP1的多抗有明显的抗原抗体反应;rOspC免疫兔血清IgG效价显著升高(1∶3200或1∶6400);体外中和试验表明实验组的免疫兔血清均能中和106个/ml的莱姆病螺旋体。结论莱姆病螺旋体的rOspC蛋白具有一定的免疫保护性, 可作为研制莱姆病多价亚单位疫苗的一个成分。

• 单位
  中国疾病预防控制中心传染病预防控制所; 温州医科大学; 生命科学学院; 传染病预防控制国家重点实验室