不同途径神经干细胞移植对肌萎缩侧索硬化神经炎症的影响

作者：林彦琛; 李晶晶; 陆广旭; 代二庆; 陈静^*; 钟士江^*

来源：中国组织工程研究, 2023, 27(15): 2363-2370.

• 神经干细胞
• 肌萎缩侧索硬化
• 炎症
• 移植途径
• 小胶质细胞
• NF-κB通路
• 运动神经元
• 炎性细胞因子

背景：神经炎症是影响肌萎缩侧索硬化进展的重要因素，体外研究显示神经干细胞有一定的抗炎作用，但在肌萎缩侧索硬化鼠体内能否抗炎，其机制及最佳移植途径尚不清楚。目的：研究不同途径移植神经干细胞对肌萎缩侧索硬化模型G93A-SOD1小鼠的抗炎作用及机制。方法：分离、鉴定神经干细胞后用绿色荧光蛋白转染；将78只70日龄G93A-SOD1小鼠分为脑室内注射组、尾静脉注射组、对照组，适应性喂养后，于84日龄经侧脑室移植入5×105个绿色荧光蛋白转染神经干细胞，经尾静脉注射1×106个绿色荧光蛋白转染神经干细胞；从85日龄开始，每周进行1次改良Wrathall运动评分、旋转实验来评价运动功能，记录起病时间、病程时间及生存时间；105日龄时，采用免疫荧光检测绿色荧光蛋白转染的神经干细胞存活、迁移、分化情况，采用Nissl染色检测运动神经元数量、Western blot检测Ch AT的表达、免疫荧光检测脊髓前角运动神经元中Neu N的表达，采用ELISA和RT-PCT检测脑脊液中肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6、转化生长因子β的蛋白和m RNA水平，采用Western blot检测脊髓组织中i NOS、CD206及NF-κB通路蛋白表达，采用苏木精-伊红染色检测腓肠肌病理变化。结果与结论：(1)提取的神经干细胞生长、分化良好，可被绿色荧光蛋白转染；(2)起病后超早期，侧脑室途径更利于神经干细胞进入中枢神经系统，降低肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6并提升转化生长因子β水平，降低i NOS并提升CD206表达水平，抑制NF-κB通路激活，减缓运动功能损害进展，减轻骨骼肌病理损害程度；(3)起病后超早期，2种途径移植神经干细胞保护脊髓前角运动神经元、延长小鼠病程时间及生存时间的能力均有限；(4)结果表明，在肌萎缩侧索硬化的起病后超早期，侧脑室可能是神经干细胞更好的移植途径，具有良好的抗炎作用，其机制可能与调节小胶质细胞极化方向、抑制NF-κB通路激活有关。

• 单位
  天津市第四中心医院; 神经内科