基因Ⅳ型猪戊型肝炎病毒重组ORF3蛋白抗原间接ELISA诊断方法的建立

作者：刘涛; 杜丽; 王凤阳; 雷明; 崔克; 成鹰; 陈品林; 王轶; 林杰材; 满初日嘎

来源：中国兽医科学, 2009, 39(04): 310-315.

DOI：10.3969/j.issn.1673-4696.2009.04.006

• 猪戊型肝炎病毒
• ORF3
• 原核表达
• 间接酶联免疫吸附试验

为建立检测猪戊型肝炎病毒(HEV)抗体的间接ELISA诊断方法,将HEV ORF3片段克隆至大肠杆菌表达载体pET42a(+)中,构建了原核表达载体pET42a-ORF3,将其转化大肠杆菌BL21(DE3),以IPTG诱导表达,并对表达的融合蛋白进行Ni2+-NTA柱纯化及SDS-PAGE、Western-blot鉴定,用纯化的融合蛋白作为包被抗原建立了间接ELISA检测方法。结果显示,GST-ORF3在大肠杆菌BL21(DE3)中获得了高效表达,表达的蛋白质分子质量约为45.5 ku,具有良好的抗原性。用建立的间接ELISA检测190份猪血清样品,阳性率为84.7%,与试剂盒检测结果相比,阳性符合率为91.5%。表明,建立的间接ELISA方法具有较好的特异性和灵敏性,可用于猪血清HEV抗体的检测。

• 单位
  海南大学; 海南省动物疫病预防控制中心