青蒿紫穗槐二烯合酶基因的克隆与表达

作者：黄瑛; 尹录录; 冯丽玲; 杨瑞仪; 杨雪芹; 曾庆平

来源：广州中医药大学学报, 2008, (01): 68-73.

DOI：10.13359/j.cnki.gzxbtcm.2008.01.001

• 青蒿/化学
• 紫穗槐二烯合酶/分析
• 基因表达 ARTEMISIA ANNUA L./chemistry
• AMORPHA-4
• 11-DIENE SYNTHASE/analysis
• GENE EXPRESSION

【目的】重建青蒿素合成代谢途径,以研制青蒿素高产微生物反应器。【方法】以低温预处理青蒿试管苗提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增紫穗槐二烯合酶基因(ADS),并导入大肠杆菌中表达。【结果】青蒿ADScDNA测序结果已在GenBank注册。当ADScDNA与谷胱甘肽硫转移酶基因(GST)融合并在大肠杆菌表达后,其菌体裂解上清中可检测到谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,表明ADS基因已有可溶性表达。当裂解上清与法呢基焦磷酸(FDP)保温后,成功地检测到青蒿特有的倍半萜烯。【结论】青蒿ADS基因已在细菌体内实现功能性表达。

• 单位
  广州中医药大学热带医学研究所; 广州军区广州总医院