摘要
【目的】重建青蒿素合成代谢途径,以研制青蒿素高产微生物反应器。【方法】以低温预处理青蒿试管苗提取总RNA,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)扩增紫穗槐二烯合酶基因(ADS),并导入大肠杆菌中表达。【结果】青蒿ADScDNA测序结果已在GenBank注册。当ADScDNA与谷胱甘肽硫转移酶基因(GST)融合并在大肠杆菌表达后,其菌体裂解上清中可检测到谷胱甘肽硫转移酶(GST)活性,表明ADS基因已有可溶性表达。当裂解上清与法呢基焦磷酸(FDP)保温后,成功地检测到青蒿特有的倍半萜烯。【结论】青蒿ADS基因已在细菌体内实现功能性表达。
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