外泌体对大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡的影响

作者：黄涛; 方红育^*; 周少怀; 卞峰; 李宏亮; 任敏; 范明宇; 汪平; 谢西茜; 张莹; 黄娅芬; 李静

来源：中华关节外科杂志(电子版), 2021, 15(04): 423-431.

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-134X.2021.04.006

• 关节炎
• 外泌体
• 胎血
• 间质干细胞
• 细胞凋亡

目的探讨人脐带间充质干细胞来源外泌体(huc-MSCs-exo)对骨关节炎(OA)大鼠软骨凋亡的影响。方法取健康、足月剖宫产新生儿脐带,分离并提取huc-MSCs-exo,选取Wistar大鼠30只,随机分为假手术组、模型组及治疗组(各10只),模型组及治疗组制备OA模型大鼠,治疗组成模后关节腔内注射huc-MSCs-exo 100μg,治疗8周后;比较各组大鼠步态障碍评分、软骨组织形态学变化、软骨细胞凋亡情况及一氧化氮(NO)表达; Real-time PCR检测软骨组织肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-4、B细胞淋巴瘤基因-2(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax) mRNA表达。另取12只大鼠,6只正常饲养、6只进行膝OA造模,模型成功后分离、培养OA软骨细胞并染色鉴定;正常软骨细胞为对照组,OA软骨细胞培养后分为OA组和实验组,实验组软骨细胞加入1 g/L huc-MSCs-exo 0.2 ml培养,对照组及OA组软骨细胞给予同体积磷酸盐缓冲液培养,3组细胞均培养24 h,LSD t检验比较各组细胞增殖抑制率、凋亡情况及NO表达。结果治疗组与模型组比较,治疗组大鼠步态障碍评分降低(t=5.49,P <0.001),NO含量降低(t=15.69,P <0.001),凋亡指数(AI)值降低(t=7.42,P <0.001),TNF-α表达量降低(t=5.74,P <0.001),IL-1β表达量降低(t=17.22,P <0.001)、IL-4表达量降低(t=11.33,P <0.001),Bax mRNA表达量降低(t=19.51,P <0.001),Bcl-2 mRNA表达量升高(t=10.12,P <0.001),差异均具有统计学意义。结论 Huc-MSCs-exo可有效改善膝骨OA大鼠软骨细胞凋亡情况,其机制可能与改善炎症反应有关。

• 单位
  武汉市第三医院