黑色素瘤B16细胞通过释放外泌体诱导na?ve CD4+ T细胞分化为Treg

作者：赵丽; 顾洪照; 张红玉^*

来源：免疫学杂志, 2022, 38(06): 524-529.

DOI：10.13431/j.cnki.immunol.j.20220072

• 外泌体
• + T细胞" name="keyword">na?ve CD4+ T细胞
• Treg
• 黑色素瘤细胞B16

目的 检测小鼠黑色素瘤细胞B16通过释放外泌体诱导na?ve CD4+T细胞分化为调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)的能力。方法 通过试剂盒和超速离心获得B16培养上清中的外泌体，用透射电镜观察外泌体形态，Western blot检测外泌体标记性蛋白的表达水平，通过Transwell共培养验证外泌体或B16细胞对na?ve CD4+T细胞诱导分化的能力，流式细胞术检测小鼠脾脏、肿瘤内Th17、Treg细胞的频率，qPCR检测T细胞亚群特异性转录因子、炎症因子的mRNA水平。结果 B16细胞外泌体的直径为30～100 nm，呈圆形碟状结构，外泌体高表达Tsg101、HSP60和Alix，低表达GAPDH；在体外，B16细胞外泌体可直接诱导na?ve CD4+T细胞分化成Treg，但不能诱导其分化为Th17；小鼠在体实验证实，B16细胞外泌体能够诱导Treg细胞并聚集于小鼠脾脏中，同时能够增加B16瘤体内Treg细胞的数量，并活化使其表达更高水平的IL-10、TGF-β和Foxp3。结论 B16细胞外泌体通过诱导na?ve CD4+T细胞分化为Treg，并将其募集至肿瘤组织，从而维持肿瘤的免疫抑制微环境。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院; 中国人民解放军联勤保障部队第九〇一医院