黄芩素、LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响

作者：汪枫; 喻小兰; 夏纪毅; 王晓燕; 唐利; 曹勇; 唐小平; 夏国栋

来源：山东医药, 2016, 56(41): 1-5.

• 肝癌
• 黄芩素
• 磷酸肌醇3激酶抑制剂
• 人肝癌细胞系SMMC-7721细胞
• 细胞凋亡

目的探讨黄芩素和PI3K特异性抑制剂LY294002对人肝癌细胞系SMMC-7721细胞增殖及凋亡的影响。方法体外培养SMMC-7721细胞,20μmol/L DMSO及0、1、5、10、20μmol/L黄芩素分别处理SMMC-7721细胞,显微镜观察细胞数量变化;20μmol/L DMSO及0、1、2、5、10、20、50、100、200和300μmol/L黄芩素和0、1、2、5、10、20、30μmol/L的LY294002处理SMMC-7721细胞24 h,CCK8法检测细胞增殖活性。将SMMC-7721细胞随机分为4组,A组加入0μmol/L黄芩素;B组加20μmol/L DMSO;C组加20μmol/L黄芩素;D组加20μmol/L黄芩素和10μmol/L LY294002,培养24 h,流式细胞术检测细胞周期并计算细胞凋亡比例、RT-PCR法和Western blotting法检测凋亡相关因子Bcl-2、Bax mRNA和蛋白表达及p-AKT活性。结果 SMMC-7721细胞数量随黄芩素/LY294002浓度增加而显著减少,细胞增殖活性明显降低(P均<0.05)。与A、B组相比,C、D组的G0G1期细胞比例明显增多(P<0.05),S期细胞比例明显下降,G2/M期细胞变化无统计学意义(P>0.05),C、D组G0G1期细胞升高比例、S期细胞降低比例比较,P<均0.05。与A组和B组相比,C、D组早期凋亡和晚期凋亡细胞均明显增多(P均<0.05),D组比C组早期凋亡和晚期凋亡细胞增多更明显(P<0.05)。与A、B组相比,C、D组抑制凋亡因子Bcl-2 mRNA水平显著降低(P<0.05),凋亡促进因子Bax mRNA水平显著增高(P<0.05);D组Bcl-2 mRNA水平比C组降低更明显,而Bax mRNA水平比C组升高更明显(P均<0.05)。与A、B组相比,C、D组凋亡抑制因子Bcl-2表达量和AKT磷酸化水平显著降低(P均<0.05),凋亡促进因子Bax表达量显著增高(P均<0.05),D组凋亡抑制因子Bcl-2表达量和AKT磷酸化水平降低比C组更明显(P均<0.05),凋亡促进因子Bax表达量升高比C组更明显(P均<0.05)。结论黄芩素与LY294002可能通过调控凋亡相关因子的表达及增加活化的AKT水平从而诱导SMMC-7721细胞凋亡,抑制其增殖,且二者有协同效应。

• 单位
  西南医科大学