芍药苷抑制醋酸铅诱导大鼠海马神经元凋亡的机制

作者：严伟伟; 李国辉; 赵佳骏; 贾仰民; 娄懿; 干晓瑜

来源：中华劳动卫生职业病杂志, 2022, 40(03).

• 海马
• 神经元
• 细胞凋亡
• 芍药苷
• 醋酸铅
• 丝裂原活化蛋白激酶
• 大鼠

目的探讨芍药苷对醋酸铅诱导海马神经元凋亡的影响及潜在机制。方法于2020年9月, 从胎鼠中分离培养原代海马神经元细胞, 并利用细胞免疫荧光法进行鉴定。MTT法测定细胞活力确定醋酸铅诱导海马神经元凋亡浓度及时间, 芍药苷细胞毒性研究评价芍药苷浓度及其对醋酸铅诱导海马神经元凋亡的影响。依据结果选取不同浓度芍药苷干预海马神经元细胞, 作用24 h后, 加醋酸铅染毒, 同时设空白组和模型组, 测定海马神经元细胞中活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、乳酸脱氢酶(LDH)、丙二醛(MDA)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3 (Caspase-3)含量;蛋白免疫印迹(Western blotting)检测海马神经元细胞中细胞外信号调节激酶(ERK)、磷酸化ERK (p-ERK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)、磷酸化p38 MAPK (p-p38MAPK)、c-Jun氨基端激酶(JNK)、磷酸化JNK (p-JNK)蛋白表达。结果分离培养的海马神经元细胞经免疫荧光化学染色鉴定后, 给予醋酸铅处理, MTT结果显示醋酸铅浓度25 μmol/L, 处理24 h毒性效果最佳。80 μmol/L以下浓度芍药苷对海马神经元细胞均无细胞毒性作用;与模型组比较, 20、40、80 μmol/L芍药苷干预组海马神经元细胞活力均明显升高(P<0.05)。与空白组比较, 模型组海马神经元细胞中ROS活力、LDH释放水平、MDA和Caspase-3含量均明显升高(P<0.01), SOD活力明显降低(P<0.01);与模型组比较, 40、80 μmol/L芍药苷干预组海马神经元细胞中ROS活力、LDH释放水平、MDA和Caspase-3含量明显降低(P<0.05), SOD活力明显升高(P<0.05)。与模型组比较, 40、80 μmol/L芍药苷干预组海马神经元细胞中p-ERK/ERK比值明显升高(P <0.01), p-p38MAPK/p38MAPK和p-JNK/JNK比值明显降低(P<0.05)。结论芍药苷可能通过MAPK信号通路, 下调p-p38MAPK、p-JNK蛋白表达, 上调p-ERK蛋白表达, 抑制醋酸铅诱导的大鼠海马神经元凋亡。

• 单位
  杭州市红十字会医院