福寿螺SOX9L基因的克隆与表达分析

作者:张爽; 苏靖景; 王欣慧; 张颖; 刘丰瑜; 刘婧琪; 袁紫霞; 吕佳励; 商凯琳; 杨受保*
来源:农业生物技术学报, 2023, 31(09): 1914-1923.

摘要

福寿螺(Pomacea canaliculata)是中国的16种危害最大的外来入侵物种之一。SOX9(SRY-related HMG box gene 9)是一类与早期胚胎发育有关的SOXE亚族基因。为探究福寿螺SOX9基因的功能,以不同发育阶段的福寿螺—仔螺(rank Ⅱ)、中螺(rank Ⅲ)和雌雄成螺(rank Ⅳ)为材料,在转录组测序的基础上,采用RT-PCR技术克隆得到福寿螺SOX9类似物基因的cDNA序列,命名为PcSOX9L(GenBank No.OP564918),并对其进行生物信息学和表达特性分析。结果表明,PcSOX9L基因包含1个1 701 bp的开放阅读框,编码566个氨基酸的假定蛋白,并含有2个保守结构域,分别是Sox-N和HMG-box-domain;PcSOX9L与其他动物SOX9蛋白的氨基酸序列相似性为52.72%~82.84%。qRT-PCR分析显示,PcSOX9L基因在雌雄成螺的性腺、肝脏、鳃、外套膜、腹足和雌性成螺的蛋白腺组织中均有表达,其中,在雄性成螺肝脏中表达量最高,且极显著高于雌性成螺的肝脏组织(P<0.01);在性腺组织中,雄性成螺的精巢比雌性成螺卵巢中的表达量高,但是差异不显著;PcSOX9L在从仔螺、中螺到性成熟成螺的3个不同发育阶段中均有表达,在仔螺中表达量最高;同时,PcSOX9L表达量在向雄性成螺发育的3个阶段中依次为仔螺>雄性成螺>中螺;在向雌性成螺发育的3个阶段中依次为仔螺>中螺>雌性成螺,提示该基因可能在福寿螺早期胚胎发育和性别决定中发挥作用。本研究为进一步分析SOX9基因在福寿螺性腺发育和性别决定中的作用机制提供基础资料。