摘要
目的探讨miR-214-5p通过调节同源盒蛋白(HOXA)13表达抑制高糖诱导的HMC细胞炎症反应和纤维化的作用机制。方法采用RT-qPCR检测高糖干预的HMC细胞中miR-214-5p、细胞间黏附分子(ICAM)-1、骨形态发生蛋白(BMP)-7和纤维连接蛋白(FN)表达。将miR-214-5p抑制剂(inhibitors)转染至HMC细胞后以30 mmol/L D-葡萄糖处理细胞,Western印迹检测细胞中ICAM-1、BMP-7和FN蛋白表达。采用Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western印迹实验验证miR-214-5p与HOXA13的靶向关系。Western印迹检测过表达HOXA13对HMC细胞中ICAM-1、BMP-7和FN蛋白表达的影响。共转染miR-214-5p inhibitors和HOXA13 siRNA,检测细胞中TGF-β1蛋白表达。结果与5 mmol/L D-葡萄糖干预的HMC细胞相比,高糖诱导的细胞中miR-214-5p mRNA、ICAM-1和FN蛋白表达上调、BMP-7蛋白表达下调。在HMC细胞中抑制miR-214-5p或过表达HOXA13细胞中miR-214-5p mRNA、ICAM-1和FN蛋白表达水平降低而BMP-7蛋白表达水平升高。Targetscan在线预测、双荧光素酶报告基因实验和Western印迹实验结果显示,miR-214-5p能够靶向调控HOXA13蛋白表达。在高糖诱导的HMC细胞中抑制HOXA13表达可逆转miR-214-5p对TGF-β1蛋白表达的抑制作用。结论 miR-214-5p能够通过靶向HOXA13调节相关蛋白表达,抑制高糖诱导的HMC细胞炎症反应和纤维化。
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单位荆州市中心医院