大鼠VGLUT2基因shRNA慢病毒载体转染原代培养脊髓神经元对VGLUT2表达的影响

作者：方相春; 张春奎; 唐君; 李志红; 张婷; 李金莲

来源：神经解剖学杂志, 2012, (06): 537-543.

• VGLUT2
• RNA干扰
• 慢病毒载体
• 脊髓原代培养神经元
• 大鼠 VGLUT2
• RNA interference
• lentiviral vectors
• primary cultured spinal cord neurons
• rat

目的:探讨新构建的可以表达针对2型囊泡膜谷氨酸转运体(vesicular glutamate transporter 2,VGLUT2)短发卡RNA(short hairpin RNA,shRNA)的慢病毒载体能否有效地感染大鼠脊髓原代培养神经元,并鉴定其对培养神经元内VGLUT2基因的特异性干扰效果,从而为进一步在整体动物脊髓水平研究VGLUT2的功能提供有力的工具。方法:首先分别将已筛选到的两对互补并靶向作用于编码大鼠VGLUT2序列两个位点的特异性shRNA序列和一个阴性对照的寡核苷酸,克隆到pGCSIL-GFP质粒(经Age I和EcoRI双酶切)载体内,经酶切、测序鉴定及转染293T...

• 单位
  第四军医大学