磷肌酰脂醇特异性磷脂酶C对内毒素介导枯否细胞激活的抑制作用

作者：吴传新; 龚建平; 刘海忠; 李旭宏; 游海波; 陈先锋; 李生伟

来源：中国急救医学, 2005, (09): 648-650.

• 磷肌酰脂醇特异性磷脂酶C
• 脂多糖
• 枯否细胞
• 脂多糖受体CD14

目的研究磷肌酰脂醇特异性磷脂酶C(PI-PLC)对内毒素介导的肝Kupffer细胞(枯否细胞,KCs)激活及其CD14表达的抑制作用。方法Wistar大鼠20只,分为PI-PLC组和LPS组,测定细胞培养液中TNF-α和IL-6含量变化,用免疫组化观察KCs膜CD14和核NF-κB的相对活性,测定KCs中CD14、TNF-α和IL-6的mRNA表达和KCs膜CD14蛋白含量变化。结果不同浓度的LPS刺激60 min后,PI-PLC组培养液中TNF-α与IL-6的含量随LPS浓度的增高而增加,但明显低于LPS组(P<0.01);CD14抗体染色显示,PI-PLC组部分KCs为弱阳性,而LPS组KCs为阳性细胞;NF-κB P65抗体染色显示,PI-PLC组部分KCs为弱阳性细胞,而LPS组KCs为强阳性细胞;PI-PLC组NF-κB活性在10μg/mL以上LPS刺激下才有升高,其相对光密度值显著低于LPS组(P<0.01);在相同浓度LPS刺激后,PI-PLC组CD14、TNF-α和IL-6的mRNA表达显著低于LPS组(P<0.01);PI-PLC组在相同浓度LPS刺激120 min后CD14蛋白表达才明显,LPS组在100μg/mL LPS刺激后30 min CD14蛋白开始升高,两者有显著性差异(P<0.01)。结论PI-PLC对LPS介导的KCs激活有明显的抑制作用,其机制可能与抑制KCs中CD14蛋白的表达有关。

• 单位
  重庆医科大学附属第二医院