褪黑素上调SIRT1改善高糖诱导原代心肌细胞损伤的机制研究

作者：艾永飞; 刘静^*; 苏菲菲; 杨竞霄; 尚福军

来源：山西医科大学学报, 2021, 52(05): 572-579.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2021.05.009

• 褪黑素
• SIRT1
• 自噬
• 凋亡

目的探讨褪黑素在高糖诱导的原代心肌细胞损伤中的作用,并明确SIRT1在其中的作用及其机制。方法将原代心肌细胞分为对照组(Con组)、褪黑素对照组(Con+Mel组)、高糖组(HG组)、高糖+褪黑素组(HG+Mel组)和SIRT1抑制剂理组(HG+Mel+EX527组)。采用Cell Counting Kit-8(CCK-8)试剂盒检测细胞活性,丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒检测细胞氧化应激水平,TUNEL染色检测细胞凋亡,免疫印迹检测SIRT1、Beclin1、Atg5、cleaved Caspase-3、Bax和Bcl-2蛋白表达水平。结果与Con组相比,HG组原代心肌细胞活力减低,氧化应激水平升高,细胞凋亡水平增加,SIRT1表达下调(P <0.05)。给予褪黑素干预后,与Con组相比,Con+Mel组SIRT1表达量增加(P <0.05),而两组间细胞活力、氧化应激水平和细胞凋亡水平无显著差异(P> 0.05)。与HG组相比,HG+Mel组原代心肌细胞SIRT1表达量提高(P <0.05),细胞活力增加(P <0.05),氧化应激水平和细胞凋亡水平下降(P <0.05)。免疫印迹结果显示,与Con组相比,HG组原代心肌细胞自噬相关蛋白Beclin1和Atg5表达减低(P <0.05),Con+Mel组Beclin1和Atg5表达明显上升(P <0.05);与HG组相比,HG+Mel组Beclin1和Atg5表达上升(P <0.05)。此外,给予SIRT1特异性抑制剂EX527干预后,相比于HG+Mel组,HG+Mel+EX527组细胞凋亡比率增加(P <0.05),凋亡蛋白cleaved Caspase-3和Bax上调(P <0.05),抗凋亡蛋白Bcl-2下调(P <0.05),细胞自噬蛋白Beclin1和Atg5表达减低(P <0.05)。结论褪黑素可能通过上调SIRT1信号增强细胞自噬,改善高糖诱导的原代心肌细胞损伤。

• 单位
  中国人民解放军空军军医大学