拟南芥35S∶NAS2载体构建和转基因株系的筛选

作者：王婷婷; 曹树青; 吴席; 贾亚峰; 陈逸凡; 樊婷婷

来源：合肥工业大学学报(自然科学版), 2024, 47(03): 417-421.

DOI：10.3969/j.issn.1003-5060.2024.03.021

• 拟南芥
• NAS2基因
• BZIP44基因
• 载体
• 转基因植株

为了研究基因NAS2和BZIP44在拟南芥缺铁胁迫响应中的遗传关系，文章以野生型(wild type, WT)拟南芥为材料构建35S∶NAS2/WT转基因植株，以拟南芥突变体bzip44为材料构建35S∶NAS2/bzip44转基因植株；提取野生型拟南芥的RNA,以其反转成的cDNA作为模板克隆NAS2的CDS区域，将双酶切后的目的片段与同样双酶切的pART27质粒进行连接，得到的连接产物转入大肠杆菌DH5α感受态中，通过菌落聚合酶链式反应(polymerase chain reaction, PCR)鉴定和测序得到阳性单克隆，然后将重组质粒转入农杆菌感受态GV3101中，获得阳性单克隆菌落；用浸花法分别侵染野生型拟南芥和纯合的拟南芥bzip44突变体植株，通过筛选和鉴定得到纯合的35S∶NAS2/WT和35S∶NAS2/bzip44转基因植株。研究结果为基因NAS2和BZIP44在拟南芥缺铁胁迫响应中的遗传关系提供参考。

• 单位
  食品与生物工程学院; 合肥工业大学