摘要

目的 体内外观察和厚朴酚(HNK)对动脉粥样硬化(AS)模型Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路及动脉硬化的影响;探讨和厚朴酚调控Wnt/β-catenin信号通路对AS形成过程影响的可能机制。方法 动物实验:8只SD大鼠作为正常对照组,24只高脂喂养SD大鼠随机分为AS组(高脂喂养+维生素D_2注射建立AS模型),AS+HNK组[建立模型后HNK腹腔注射5 mg/(kg·d),2次/d,连续8周]和AS+HNK-PNU组[AS+HNK组的基础上加用Wnt/β-catenin拮抗剂PNU-74654 100 mg/(kg·d),连续8周],每组8只。检测各组血脂水平,HE染色图像分析测定胸主动脉中膜面积及血管壁厚度,免疫印迹法检测大鼠胸主动脉组织Wnt/β-catenin的蛋白表达。细胞实验:培养人脐静脉内皮细胞(HUVEC)及人主动脉平滑肌细胞(HA-VSMC)分为对照组、AS模型组[使用20 mg/L氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)干预48 h诱导建立细胞AS模型],AS+HNK组(AS+HNK 32μmol/L干预48 h)、AS+HNK-PNU组(AS+HNK 32μmol/L+PNU-74654 50μmol/L干预48 h);分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)法和Western blot法检测细胞Wnt3a和β-catenin mRNA及蛋白质表达。采用Transwell小室实验检测HA-VSMC迁移能力。结果 动物实验:与对照组相比,AS组血清三酰甘油、总胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平升高(均P<0.05),与AS组比较,AS+HNK组和AS+HNK-PNU组血脂水平降低(P<0.05)。与对照组比较,AS组大鼠胸主动脉中膜面积及血管壁厚度增加(均P<0.01);胸主动脉组织Wnt/β-catenin蛋白表达水平增加(P<0.05);和厚朴酚可降低AS模型大鼠胸主动脉中膜面积及血管壁厚度和Wnt/β-catenin蛋白表达水平(P<0.05),联合使用PNU-74654此效应下降。细胞实验:两种细胞株模型组Wnt3a及β-catenin mRNA和蛋白表达水平高于对照组;AS+HNK组的Wnt3a、β-catenin蛋白表达与mRNA相对表达量低于AS+HNK-PNU组及AS组(均P<0.05)。AS组HA-VSMC迁移能力高于对照组,AS+HNK组与AS...

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