腺病毒/日本脑炎病毒复制子嵌合载体的构建

作者：李红梅; 孙元; 亓文宝; 孟其麟; 田大勇; 廖明; 仇华吉

来源：中国预防兽医学报, 2013, (10): 804-808.

• 日本脑炎病毒复制子
• 腺病毒
• 内含子
• 嵌合载体 Japanese encephalitis virus replicon
• adenovirus
• intron
• chimeric vector

为解决日本脑炎病毒(JEV)复制子DNA疫苗载体不稳定和递送效率低的缺点,本研究利用具有高效递送效率的人5型复制缺陷性腺病毒(AdV)来递送JEV复制子,构建嵌合载体。本研究将已构建的含有增强型绿色荧光蛋白(EGFP)基因的JEV复制子克隆至经过改造的带有SwaⅠ酶切位点的pShuttle-CMV载体中,再将来自pCI载体的嵌合内含子插入JEV复制子中,得到转移载体pSh-JEV-In-EGFP,经SwaⅠ线性化后电转化至含有腺病毒骨架载体AdEasy-1的BJ5183感受态细胞,将所得重组腺粒经PacⅠ线性化后转染HEK293细胞,传代直至出现细胞病变,得到含有表达EGFP的JEV复制子的重...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 农业部; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所; 华南农业大学