鸭腺病毒3型Fiber-2蛋白单克隆抗体的制备及初步应用

作者：魏常青; 史馨瑾; 吕璐; 刘英楠; 谢振华; 陈宗艳^*; 陈鸿军^*

来源：中国家禽, 2023, 45(02): 46-51.

DOI：10.16372/j.issn.1004-6364.2023.02.008

• DAdV-3
• Fiber-2
• 单克隆抗体

为进一步研究鸭腺病毒3型（DAdV-3）Fiber-2蛋白，研究通过PCR扩增fiber-2基因，构建p ET32a-DAdV3-fiber2原核质粒，表达并纯化蛋白，以纯化的蛋白为免疫原，免疫6周龄雌性BALB/c小鼠制备抗Fiber-2单克隆抗体杂交瘤细胞，采用间接免疫荧光试验和免疫印迹试验进行鉴定，并用于DAdV-3 Fiber-2杆状病毒表达产物的鉴定。结果显示：原核表达获得1.77 mg/mL Fiber-2蛋白，筛选获得2株阳性单克隆细胞株2E10E4和4F7F10，两株单克隆抗体均为IgG 1型，轻链类型为κ；DAdV-3感染的LMH细胞中存在特异性荧光，免疫印迹试验确认在约59 ku处出现特异性条带；采用制备的单克隆抗体确认了表达Fiber-2蛋白的重组杆状病毒。研究获得了针对DAdV-3 Fiber-2蛋白的单克隆抗体，为深入探究Fiber-2在DAdV-3感染机制中的作用以及为建立DAdV-3抗原免疫测定技术奠定了基础。

• 单位
  中国农业科学院上海兽医研究所