CGRP/ASIC3参与大鼠食道扩张内脏痛模型中背根神经节神经元高敏感机制的研究

作者：许草; 顾勇; 石亚婷; 汪桂祥; 牛小平^*

来源：沈阳医学院学报, 2023, 25(01): 19-29.

DOI：10.16753/j.cnki.1008-2344.2023.01.004

• 酸敏感离子通道3
• 降钙素基因相关肽
• 脊髓背根神经节
• 食管扩张
• 内脏高敏感

目的：探讨降钙素基因相关肽（CGRP）和酸敏感离子通道3 (ASIC3)参与大鼠食道扩张（ED）内脏痛模型中脊髓背根神经节（DRG）神经元高敏感发生的机制。方法：将50只健康雄性SD大鼠随机分为实验组（n=30）和对照组（n=20）。腹腔麻醉50只SD大鼠，暴露大鼠食管下段，利用PE-240管对实验组大鼠的胸段食管进行1 h重复ED刺激，对照组则不予处理。分离并培养50只大鼠胸段脊髓DRG神经元，根据实验组培养液中有无加入CGRP拮抗剂（CGRP8-37）将其进一步分为ED组（n=15）和ED+CGRP8-37组（n=15）。采用全细胞膜片钳技术记录DRG神经元动作电位及ASIC3电流变化；免疫荧光法检测DRG神经元中CGRP、ASIC3的表达定位；逆转录实时聚合酶链反应（qRT-PCR）法检测CGRP与ASIC3 mRNA表达；Western blot法检测CGRP与ASIC3蛋白表达。结果：ED组DRG神经元动作电位数较对照组显著增加（P<0.01）；免疫荧光结果示CGRP与ASIC3在DRG神经元中存在共表达；与对照组比较，ED组CGRP与ASIC3的mRNA、蛋白水平显著上调（P<0.01）；且CGRP的mRNA、蛋白表达与ASIC3的mRNA、蛋白表达均呈正相关（r分别为0.833、0.981,P<0.01）;ED组和ED+CGRP8-37组ASIC3电流较对照组显著增加（P<0.01）,ED+CGRP8-37组ASIC3电流较ED组明显减少（P<0.01）。结论：CGRP和ASIC3共同参与了ED模型中DRG神经元的超敏反应，CGRP参与调节ASIC3电流变化可能是DRG神经元高敏感发生的重要机制之一。

• 单位
  皖南医学院弋矶山医院; 皖南医学院