科研之友
微信
新浪微博
Facebook
分享链接
摘要
本研究主要探讨了阿司匹林对肝细胞生长因子/细胞间质表皮转化因子受体(HGF/c-Met)轴介导的肿瘤生物学效应的影响,初步探究阿司匹林抑制肿瘤转移的分子机制。利用分子模拟预测阿司匹林与c-Met的结合情况;采用蛋白质胞内热稳定性实验验证阿司匹林在细胞水平与c-Met的结合情况;采用激酶活性检测阿司匹林对c-Met激酶的抑制作用; Western blot、细胞分散实验、细胞分枝形态变化实验及Transwell实验用于检测细胞信号转导、形态与迁移能力的变化。结果显示,阿司匹林能够有效抑制c-Met的激酶活性,半数抑制浓度为0.95 mmol·L-1。分子模拟实验结果显示,阿司匹林能够结合在c-Met蛋白的ATP口袋,主要结合位点为Tyr1230、Tyr1159和Met1229。同样,蛋白质胞内热稳定性实验显示,阿司匹林能够与c-Met蛋白结合。Western blot结果显示,阿司匹林能够浓度依赖性地抑制HGF刺激后磷酸化Met的上调。细胞分散实验结果显示,阿司匹林能够浓度依赖性地阻断HGF/c-Met介导的细胞分散,在4 mmol·L-1浓度下阿司匹林几乎可以完全阻断c-Met活化介导的生物学功能,且该阻断作用与HGF无关。同样,细胞分枝实验结果显示,阿司匹林能够浓度依赖性抑制HGF/c-Met介导的MDCK细胞侵袭性生长细胞分枝的形态变化。Transwell实验结果显示,阿司匹林能够浓度依赖性地阻断HGF/c-Met介导的细胞迁移与侵袭,在4 mmol·L-1浓度下阿司匹林几乎可以完全阻断c-Met活化介导的生物学功能,且该阻断作用与HGF无关。以上结果表明,阿司匹林能够与c-Met结合,进而阻断HGF/c-Met介导的生物学效应,从而发挥抑制肿瘤转移的作用。本研究揭示了阿司匹林的新生物学功能,为全面理解阿司匹林的抗肿瘤转移作用提供了新的理论基础。
- 单位
