重组葡萄糖脱氢酶酶学性质研究

作者：张秀华; 刘英梅; 郭新艳; 张小刚; 张艳艳; 张晓元; 刘飞^*

来源：食品与药品, 2022, 24(06): 493-497.

• 熊去氧胆酸
• 葡萄糖脱氢酶
• 辅酶再生
• 酶学性质

目的 对重组葡萄糖脱氢酶(rGDH)酶学性质进行研究。方法 对rGDH进行纯化，取纯化后的rGDH，测定其最适反应温度、最适pH、金属离子耐受性、有机溶剂耐受性、底物偏好性、辅酶依赖性、米氏常数(Km)等酶学特征。结果 经测定rGDH的最适反应温度为40℃，最适反应pH为10.5，对D-葡萄糖的Km为0.3 mol/L，该酶只耐受特定有机溶剂，大部分金属离子对其酶活有促进作用，且具有较强的底物特异性，是一种NAD+、NADP+双辅酶依赖型酶，但对NAD+具有更强的亲和力。结论 本研究筛选并表达得到耐碱的rGDH，解决了大规模酶法制备熊去氧胆酸反应中辅酶再生问题，降低了生产成本。

• 单位
  山东省药学科学院