硒抑制长链非编码RNA HOXB-AS1表达调控胃癌增殖的作用及其机制

作者：樊斌; 孙率真; 张家耀^*; 张碧涛; 姜毅楠; 李炫飞; 孙建华

来源：中华实验外科杂志, 2022, 39(11).

• 硒
• HOXB-AS1
• 胃癌
• 蛋白激酶B/雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白通道

目的探讨硒抑制长链非编码RNA HOXB cluster antisense RNA1(HOXB-AS1)表达调控胃癌增殖的作用及其机制。方法对人胃癌HGC-27、SNU-1, KATO Ⅲ细胞和人胃黏膜上皮细胞使用实时聚合酶链反应(RT-PCR)检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平;根据亚硒酸钠添加的浓度将高表达HOXB-AS1基因的细胞分为空白组、5 μmol/L组、10 μmol/L组、15 μmol/L组、20 μmol/L组、25 μmol/L组、30 μmol/L组, 分别培养24、48、72 h后采用细胞计数试剂(CCK-8)检测各组细胞活力, 筛选亚硒酸钠的最佳作用浓度;用30 μmol/L亚硒酸钠干预人胃癌HGC-27细胞, 采用RT-qPCR检测细胞内HOXB-AS1基因表达水平, 采用CCK-8检测细胞活力, 采用流式细胞术检测细胞凋亡比例变化, 运用蛋白质印迹法(Western blot)法检测蛋白激酶B(Akt)及雷帕霉素的哺乳动物靶标蛋白(mTOR)的表达水平。组间比较采用t检验, 多组间比较采用单因素方差分析。结果 RT-PCR检测结果表明, 与其他细胞株比较, 人胃癌HGC-27细胞HOXB-AS1基因的表达水平最高(5.37±0.14, F=386.913, P<0.05);CCK-8结果显示30 μmol/L亚硒酸钠组的平均细胞抑制率都显著高于其他5组(F24 h=178.105, F48 h=1 093.759, F72 h=473.833, P<0.05);RT-PCR检测结果表明, 亚硒酸钠干预后的HGC-27人胃癌细胞的HOXB-AS1表达水平(0.11±0.01)显著低于对照组(t=43.895, P<0.05), 而细胞凋亡率[(36.36±0.46)%]则显著高于对照组(t=-26.737, P<0.05);Western blot结果显示亚硒酸钠组的Akt(1.02±0.00)、磷酸化Akt(p-Akt, 0.32±0.02)、mTOR(0.79±0.00)和磷酸化mTOR(p-mTOR, 0.49±0.02)的相对表达量都显著低于对照组(tAkt=27.951, tp-Akt=47.666, tmTOR=37.898, tp-mTOR=25.307, P<0.05)。结论硒能够通过抑制人胃癌细胞的lncRNA HOXB-AS1表达来影响Akt/mTOR通路, 从而促进人胃癌细胞的凋亡来抑制胃癌的增殖。

• 单位
  武汉大学中南医院; 恩施土家族苗族自治州中心医院