乙型脑炎病毒SXBJ07株E基因的克隆及原核表达

作者：王韦华; 刘桂梅; 张彦明

来源：黑龙江畜牧兽医, 2012, (09): 103-105.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2012.09.006

• 乙型脑炎病毒
• E蛋白基因
• 基因克隆
• 原核表达载体 Japanese encephalitis virus(JEV)
• E-protein gene
• gene cloning
• prokaryotic expression vector

为构建乙型脑炎病毒(JEV)SXBJ07株E基因的原核表达载体,并在大肠杆菌中进行高效表达;根据JEV SXBJ07株基因组全序列设计1对特异性引物,RT-PCR扩增E基因全长;将目的基因插入pGEM-T连接载体,筛选出阳性重组质粒;将该质粒克隆至原核表达载体pET32α中,再转化入大肠杆菌BL21,经IPTG诱导表达后对其产物进行SDS-PAGE电泳分析和Western-blot检测。结果表明:扩增到了全长为1 500 bp的JEV SXBJ株E蛋白基因;重组质粒pET-32α-E构建成功;融合蛋白可以与乙脑阳性血清抗体特异性结合。说明在大肠杆菌中成功表达了JEV E蛋白。

• 单位
  渭南职业技术学院; 西北农林科技大学