摘要
目的研究杜仲叶提取物对人牙周膜干细胞(hPDLSCs)体外增殖与成骨分化的影响。方法原代培养hPDLSCs,分别将含10-4,10-5,10-6 g/ml杜仲叶提取物的传统矿化诱导培养基与hPDLSCs作用作为实验组,以DMEM完全培养基为空白对照组,以传统矿化诱导培养基为阳性对照组。四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测各组细胞的增殖活性、检测碱性磷酸酶(ALP)活性、RT-PCR法检测各组细胞成骨相关基因(Runx2,OPN,OCN)的表达。结果 MTT结果显示,5组细胞分别培养1 d后,OD值均较小,组间无显著差异(P>0.05)。各组细胞OD值在3~7 d持续增加,实验组显著高于空白对照组和阳性对照组(P<0.05)。浓度为10-4,10-5,10-6 g/ml的杜仲叶提取物均可促进hPDLSCs的增殖,且各实验组OD值随着杜仲叶提取物质量浓度的增加而增加,存在剂量依赖效应。3个实验组和阳性对照组ALP活性均明显增高,且各实验组与阳性对照组差异显著(P<0.05)。空白对照组的ALP活性变化不显著。ALP活性变化具有时间依赖性,实验组和阳性对照组从第5天开始显著升高,第7天达到最高值。RT-PCR结果显示,各实验组和阳性对照组的Runx2,OPN,OCN表达均上调,且3个基因的表达量在各实验组均明显高于阳性对照组、空白对照组(P<0.05,P<0.01)。结论质量浓度为10-4,10-5,10-6 g/ml的杜仲叶提取物可促进hPDLSCs增殖和成骨分化,其中10-4 g/ml浓度作用最显著。
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单位包头医学院