linamarase稳定转染肝癌细胞系的建立及研究

作者：李军; 朱靓; 郑瑞国; 李海民; 陈明浩; 马俊; 窦科峰

来源：中国普外基础与临床杂志, 2011, (08): 829-834.

• Linamarase
• 自杀基因
• 酶-前药体系
• 原发性肝癌 Linamarase
• Suicide gene
• Enzyme-prodrug system
• Hepatocellular carcinoma

目的构建含木薯linamarase(lis)基因的稳定转染肝癌细胞系,并对其生物学特性进行研究。方法应用PCR法从木薯的DNA中扩增出lis基因,将其克隆至pcDNA3.1( )质粒中,构建重组质粒pcDNA3.1/lis。通过脂质体法将其转染人肝癌细胞系HepG2,进行G418筛选,获得稳定转染的肝癌细胞系HepG2/lis,通过免疫荧光染色、RT-PCR和Western blot法鉴定lis在细胞中的表达;采用Lambert法对细胞内lis酶的活性进行分析;采用MTT法观察稳定转染细胞系生长曲线,流式细胞仪分析细胞周期,裸鼠成瘤实验分析其体内成瘤特性。结果 lis基因能稳定整合于真核细胞中...

• 单位
  西京医院; 第四军医大学