猪生殖与呼吸综合征病毒CH-1a株GP5蛋白基因的表达及其单克隆抗体的制备

作者：周艳君; 安同庆; 薛强; 仇华吉; 童光志; 刘金霞; 田志军; 王云峰; 彭金美

来源：中国兽医科技, 2005, (11): 20-25.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2005.11.004

• 猪生殖与呼吸综合征病毒
• GP5蛋白
• 单克隆抗体 porcine reproductive and respiratory syndrome virus
• glycoprotein5
• monoclonal antibody

将猪生殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)CH-1a株GP5蛋白基因信号肽部分删除后克隆于pGEX-6p-1载体上,并在大肠埃希氏菌中进行表达。经SDS-PAGE电泳分析发现,融合表达的rtGP5蛋白约42 ku,将融合蛋白rtGP5用PRRSV阳性血清进行Western-blotting分析,证实所表达的融合蛋白能被其特异性识别。收获融合表达产物rtGP5,按50μg/只的剂量与等量弗氏佐剂乳化,经腹腔免疫BALB/c小鼠3次后,取脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行融合,分别以融合蛋白rtGP5和GST蛋白为抗原,通过间接ELISA方法对融合细胞的上清液进行检测,筛选阳性克隆,结果得到了15株能稳...

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所