慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2基因的克隆和表达分析

作者:欧倩; 王博雅; 杜恬恬; 黄艳; 曹颖; 胡尚连*
来源:西北植物学报, 2020, 40(11): 1833-1839.

摘要

糖外排转运蛋白(sugar will eventually be exported transporters, SWEET)在植物光合同化产物的运输中主要参与韧皮部糖的装载过程。该研究基于慈竹转录组库筛选出9条完整的BeSWEET序列,对其进行生物信息学分析,以慈竹茎和嫩叶的cDNA为模板对9条BeSWEET序列中的BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2进行基因克隆,采用实时荧光定量(qRT-PCR)分析其在叶肉、叶脉、根、茎中的表达水平以及外源糖诱导下的表达变化。结果表明:(1)系统进化分析显示,9条BeSWEET序列被分为4大类群,其中BeSWEET4-2与水稻SWEET4近缘,聚类到CladeⅡ,具有2个MtN3保守结构域;BeSWEET1a-2与水稻SWEET1a和SWEET1b近缘,聚类到CladeⅠ。(2)序列分析显示,慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2分别编码256个和222个氨基酸,分别具有7个和5个跨膜结构域。(3)亚细胞定位预测显示:慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2均定位于质膜。(4)qRT-PCR结果显示,慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2在叶肉、叶脉、根和茎中均有表达,分别在根和叶脉中最为显著,推测其可能协作参与了糖类从源到库的转运。(5)在外源己糖诱导下慈竹BeSWEET4-2和BeSWEET1a-2均显著上调表达,显示出对己糖的偏好性。该研究结果为进一步探讨慈竹BeSWEET蛋白调控糖转运的生物学功能奠定了基础。