利用单个B细胞分选方法获得HIV-1单克隆抗体基因及功能鉴定

作者：鞠斌; 郝彦玲; 李丹; 任莉; 梁华; 王硕; 侯佳利; 魏民^*; 邵一鸣^*

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2018, 38(07): 481-487.

• 单个B细胞分选
• 抗体基因
• 序列分析
• 结合能力
• 中和活性

目的从人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus-1,HIV-1)感染者中获得单克隆抗体基因及功能鉴定。方法单细胞流式分选得到抗原特异性单个B细胞,基因扩增和测序得到抗体可变区序列,BioEdit软件包中Sequence Identity Matrix程序分析基因序列一致性,免疫遗传学数据库分析抗体基因家系和突变率,酶联免疫吸附试验测定抗体结合能力,TZM-bl/假病毒试验检测抗体中和能力。结果从3个HIV-1感染者中分别获得了4个、7个和11个不同抗体的重链和轻链基因序列,其基因家系、CDR3长度和突变率广泛多样;验证了一个感染者的4个抗体基因序列,抗体A1和B3是HIV-1单克隆结合抗体,能同时与B亚型、CRF01AE和CRF07BC抗原蛋白结合;A1和B3也是HIV-1单克隆中和抗体,能够中和C亚型的MW965病毒,50%抑制浓度分别为0.04μg/ml和37.34μg/ml。结论本研究成功获得了大量的单克隆抗体基因,并对其中的部分序列进行了功能验证,为单克隆抗体的分离和鉴定等研究工作提供了基础。

• 单位
  传染病预防控制国家重点实验室; 南开大学; 中国疾病预防控制中心性病艾滋病预防控制中心