重配H9N1亚型流感病毒感染性克隆的构建及鉴定

作者:龙川; 赵权; 田明尧; 杨晓琳; 李洋; 任静强; 吕亚楠; 王成; 颜雯; 金宁一
来源:黑龙江畜牧兽医, 2012, (01): 88-90+158.
DOI:10.13881/j.cnki.hljxmsy.2012.01.008

摘要

为了研究禽流感病毒的反向遗传,试验采用霍夫曼发明的8质粒拯救系统,将分离得到的AIV Isolate3(H9N2)基因组,通过RT-PCR得到HA基因,并克隆到以pcDNA3质粒为骨架自行构建的双向转录/表达载体pHW2008上,得到HA转录/表达质粒,再将HA表达质粒与构建好的包含A/Puerto Rico/8/34(H1N1)7个内部基因双向转录/表达质粒共转染人肾上皮细胞(293T)与犬肾细胞(MDCK)混养细胞。结果表明:试验成功构建了重配H9N1亚型流感病毒减毒株。

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