天蓝淡红链霉菌SIPI-1482中dnrV基因的克隆及应用

作者：宫倩; 谢丽萍; 胡又佳; 朱春宝; 朱宝泉

来源：中国医药工业杂志, 2007, (02): 85-89.

• dnrV基因
• 柔红霉素
• 克隆
• 表达 dnrV gene
• daunorubicin
• cloning
• expression

通过PCR从柔红霉素产生菌天蓝淡红链霉菌SIPI-1482基因组DNA中扩增出约840bp的目的片段,其中包括了长度为828bp的dnrV全长序列。将dnrV基因克隆至大肠杆菌表达载体pET-32a(+)及pET-28a(+)中,在宿主菌BL21(DE3)中经IPTG诱导后表达,经SDS-PAGE电泳和Western blotting验证正确。进一步将dnrV和doxA基因克隆至链霉菌表达载体pYG505和pYG907并转化SIPI-1482,筛选得到的硫链丝菌素抗性转化子发酵实验证明两个基因的协同表达能提高柔红霉素的产量。

• 单位
  上海医药工业研究院; 华北制药集团有限责任公司