家蚕中心体蛋白基因BmCnn的鉴定及表达分析

作者：蒋霞; 周晓林; 陈鹏; 魏昳; 潘敏慧; 鲁成^*

来源：蚕业科学, 2022, 48(02): 103-110.

DOI：10.13441/j.cnki.cykx.2022.02.002

• 中心体蛋白
• 多克隆抗体
• 基因表达
• 胞质分裂

Centrosomin(CNN)是中心粒周围物质(PCM)和星形微管组装所需的核心中心体蛋白，能将PCM锚定到中心粒上，并维持它们之间的适当连接，以确保有丝分裂时中心体的准确分离，进而保证细胞的正常分裂。PCR扩增得到家蚕中心体蛋白基因BmCnn的全长CDS序列，通过生物信息学分析BmCNN蛋白具有典型的CNN＿1N结构域并在进化上保守；将PCR扩增产物亚克隆到原核表达载体pET-28a,随后将表达的重组蛋白免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体，Western blot检测该抗体能够特异性识别家蚕细胞中2种大小不同的BmCNN;利用免疫荧光分析BmCNN的亚细胞定位，结果显示BmCNN定位于细胞质中；半定量PCR检测BmCnn在家蚕5龄第3天幼虫精巢、卵巢、头部等组织中高表达，而在丝腺组织中低表达，Western blot对BmCNN的检测结果与之基本一致。研究结果可为后期解析BmCnn基因的功能奠定基础，为阐明BmCNN在不同细胞分裂形式中的功能差异及具体调控机制提供新的方向。

• 单位
  家蚕基因组生物学国家重点实验室; 西南大学