塞内卡谷病毒和口蹄疫病毒双重荧光RT-PCR检测方法的建立

作者：林彦星; 花群俊; 曹琛福; 杨俊兴; 阮周曦; 曾少灵; 张彩虹; **; 花群义^*

来源：中国兽医学报, 2019, 39(06): 1070-1074.

DOI：10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.05

• 塞内卡谷病毒
• 口蹄疫病毒
• 双重荧光RT-PCR
• 3D基因

为建立塞内卡谷病毒(SVV)和口蹄疫病毒(FMDV)的快速鉴别检测方法,本试验根据SVV 3D基因序列和FMDV 3D基因序列,分别设计探针和引物,建立了可同时检测SVV和FMDV的双重荧光RT-PCR法。结果表明,该方法特异性强,能准确检测出SVV核酸和FMDV核酸,与水泡性口炎病毒(VSV-IND和VSV-NJ)、猪水泡病病毒(SVDV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)以及猪瘟病毒(CSFV)等病原核酸无交叉反应;灵敏度高,本试验中最低可检测到SVV和FMDV核酸质量浓度分别为1.35×10-5,1.68×10-5 mg/L。重复性好,Ct值变异系数小于4%。利用所建立方法对116份已知的临床样品进行检测,结果与参比方法一致。本试验建立的方法可用于SVV和FMDV的鉴别检测,为塞内卡病毒病和口蹄疫的诊断提供依据。

• 单位
  深圳海关动植物检验检疫技术中心