PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路在双酚A诱导小鼠睾丸支持细胞凋亡中的作用

作者：刘暑霞; 张玲; 柳赟昊; 汪利芳; 全超

来源：卫生研究, 2023, 52(04): 591-597.

DOI：10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2023.04.012

• 双酚A
• 细胞凋亡
• 小鼠睾丸支持细胞
• 内质网应激

目的 探讨双酚A(bisphenol A,BPA)对小鼠睾丸支持细胞(mouse testicular sertoli cells, TM4细胞)增殖和凋亡的影响及PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路在其中的作用。方法 用不同浓度BPA(0、25、50和100μmol/L)及100μmol/L BPA联合蛋白激酶R样内质网激酶(protein kinase R-like ER kinase, PERK)抑制剂GSK2656157处理TM4细胞24 h后，利用TUNEL染色观察TM4细胞凋亡情况，Western blot检测凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2、cleaved Caspase-3,内质网应激相关蛋白GRP78及PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路相关蛋白的表达情况。结果 25、50和100μmol/L BPA染毒组TM4细胞的凋亡率分别增加为3.31%±0.34%、7.51%±1.10%和14.58%±0.91%,显著高于对照组的0.73%±0.03%(P<0.05);与对照组(1.00)相比，25、50和100μmol/L BPA染毒组TM4细胞的cleaved Caspase-3蛋白表达量分别升高为1.49±0.11、1.59±0.12和2.42±0.24,Bax/Bcl-2比值分别升高为2.06±0.19、3.94±0.34和6.14±0.71,GRP78蛋白表达量分别升高为1.29±0.06、1.39±0.06和1.92±0.17,p-PERK蛋白表达量分别升高为1.64±0.03、2.52±0.09和2.80±0.11,p-eIF2α蛋白表达量分别升高为1.79±0.05、2.48±0.10和4.77±0.32,ATF4蛋白表达量分别升高为2.51±0.03、3.24±0.14和7.45±0.51,CHOP蛋白表达量分别升高为1.44±0.01、3.20±0.11和3.80±0.11,差异均具有统计学意义(P<0.05)。与100μmol/L BPA染毒组相比，100μmol/L BPA+10μmol/L GSK2656157组p-PERK、p-eIF2α、ATF4、CHOP、cleaved Caspase-3蛋白表达量及Bax/Bcl-2比值分别降低为2.17±0.11、1.81±0.13、1.71±0.23、2.18±0.22、1.43±0.03和2.22±0.13,TM4细胞的凋亡率也显著降低为7.28%±0.47%,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论 BPA通过激活内质网应激并调控PERK-eIF2α-ATF4-CHOP通路诱导TM4细胞发生凋亡。

• 单位
  武汉市肺科医院; 公共卫生学院; 中心实验室; 武汉科技大学