Mre11多克隆抗体的制备及初步鉴定

作者：张付平; 王蕾; 郭莲娣; 王海斌; 任来峰; 曾鸣; 刘鳐; 马蕾

来源：西部医学, 2013, (03): 325-328.

• Mre11
• 多克隆抗体
• 原核表达
• MRN复合体 Mre11
• Polyclonal antibody
• Prokaryotic expression
• MRN complex

目的原核表达人Mre11蛋白,并制备出Mre11蛋白的多克隆抗体,为研究Mre11蛋白功能奠定基础。方法以人cDNA文库为模板,构建出原核表达质粒PET41a-Mre11,然后转化受体菌E.coli BL21,再经IPTG诱导表达,通过采用GST亲和纯化获得GST-融合蛋白,将该融合蛋白免疫兔以制备出Mre11多抗血清,最后采用western-blot及免疫荧光等方法检测其在细胞中的特异性。结果在受体菌E.coli BL21中成功诱导表达出了GST-Mre11融合蛋白,免疫新西兰大白兔后获得了高效价的Mre11蛋白抗血清,IP、western-blot及免疫荧光等多种方法检测证实该抗血清能够特...

• 单位
  四川大学华西第二医院; 四川大学