猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎二重RT-PCR检测方法的建立及应用

作者：董波; 安永帅; 李静楠; 戴爱玲; 李晓华; 杨小燕^*

来源：黑龙江畜牧兽医, 2018, (19): 126-129.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2017.09.0426

• 猪流行性腹泻病毒
• 猪传染性胃肠炎病毒
• 二重RT-PCR
• 检测
• 建立
• 应用

为了建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)的快速鉴别诊断方法,试验根据GenBank中已发表的PEDV和TGEV的相关基因序列,设计合成特异性引物,分别进行单项PCR最佳反应条件的摸索;确定最佳反应条件后建立PEDV和TGEV的二重RT-PCR检测方法,并进行特异性分析;同时采用单项RT-PCR和二重RT-PCR法检测临床样本,比较两种方法的检出率。结果表明:试验成功建立了PEDV和TGEV的二重RT-PCR检测方法,经最佳退火温度摸索,二重RT-PCR法的最佳退火温度为58.1℃;经特异性分析,二重RT-PCR法对PEDV和TGEV具有很好的特异性;临床样本的检测结果显示,二重RT-PCR法与单项RT-PCR法检出率基本吻合。说明试验建立的PEDV和TGEV的二重RT-PCR检测方法可用于猪传染性胃肠炎和猪流行性腹泻病的快速鉴别诊断。

• 单位
  生命科学学院; 龙岩学院