鸡传染性支气管炎病毒E蛋白真核表达载体的构建及其产物抗原性的鉴定

作者：袁园; 张愉; 张丽华; 范文胜; 韦天超; 黄腾; 磨美兰^*; 韦平^*

来源：畜牧与兽医, 2019, 51(11): 109-113.

• 传染性支气管炎病毒
• E蛋白
• 真核表达
• 重组杆状病毒

以鸡传染性支气管炎病毒(IBV)GX-YL5毒株为模板,PCR扩增其E基因并克隆至融合有His标签的杆状病毒转移载体pFastBacTM/HBM-TOPO,构建重组转移载体pFastBacTM/HBM-TOPO-E,转化DH10BacTM感受态,经同源重组后转染Sf9细胞,并应用间接免疫荧光试验(IFA)和Western blot进行鉴定。IFA结果表明融合了E蛋白的表达产物可被抗His标签的鼠单克隆抗体识别,在感染的细胞膜表面呈现强的黄绿色荧光;Western blot结果显示融合了E蛋白的表达产物既可被抗His标签的鼠单克隆抗体识别,也可被GX-YL5株的多抗血清特异性识别,且二者的目的条带大小均为16 ku。说明本研究已成功在Sf9细胞中表达了E蛋白,且表达产物抗原性良好,为进一步探讨IBV E蛋白的生物学功能和构建病毒样颗粒提供了基础。

• 单位
  广西大学